薄層色譜實驗原理

薄層色譜實驗原理

1、原理：  薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又稱薄層層析，屬于固－液吸附色譜。樣品在薄層板上的吸附劑（固定相）和溶劑（移動相）之間進行分離。由于各種化合物的吸附能力各不相同，在展開劑上移時，它們進行不同程度的解吸，從而達到分離的目的。

2、薄層色譜的用途：   

①化合物的定性檢驗。（通過與已知標準物對比的方法進行未知物的鑒定）   在條件一致的情況，純碎的化合物在薄層色譜中呈現一定的移動距離，稱比移值（Rf值），所以利用薄層色譜法可以鑒定化合物的純度或確定兩種性質相似的化合物是否為同一物質。但影響比移值的因素很多，如薄層的厚度，吸附劑顆粒的大小，酸堿性，活性等級，外界溫度和展開劑純度、組成、揮發性等。所以，要獲得重現的比移值就比較困難。為此，在測定某一試樣時，用已知樣品進行對照。

   Rf=原點到組分斑點中心的距離/原點到溶劑前沿的距離

②快速分離少量物質。 （幾到幾十微克，甚至0.01µg）  

      ③跟蹤反應進程。在進行化學反應時，常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失，來判斷反應是否完成。  

④化合物純度的檢驗（只出現一個斑點，且無拖尾現象，為純物質。）  此法特別適用于揮發性較小或在較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的物質。